抗萬(wàn)古霉素腸球菌（VRE）顯色培養基使用說(shuō)明書(shū)

法國科瑪嘉VRE顯色培養基

用于耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌（E.faecalis）和尿腸球菌(E.faecium)的鑒定和計數。

【組分】

瓊脂                               15.0g/L

蛋白胨和酵母浸出物                 20.0 g/L

色素                               27.3 g/L

鹽類(lèi)                               5.0 g/L

PH                                6.8±0.2

根據需要，可以進(jìn)行經(jīng)典配方的調整或補充。

【操作】

1. 稱(chēng)取瓶?jì)雀煞?7.3g，用1000ml蒸餾水或純水溶解，可以按照67.3 g/L的比例擴大或 縮小。
2. 將上述干粉緩慢倒入蒸餾水中，充分攪拌直至瓊脂*溶解。
3. 加熱至100℃，并且不斷攪拌。如果使用高壓鍋，請不要加壓，加熱不能超過(guò)100℃。使用微波爐加熱時(shí)，在煮沸后立即移出微波爐并不斷攪拌，而后移入微波爐再加熱，直至*溶解（大氣泡代替泡沫產(chǎn)生，大約需要2分鐘）。
4. 把VRE基礎培養基冷卻至45－50℃備用，此基礎培養基為乳白色。
5. 取增補劑一瓶，加入1ml 54%酒精溶解，以無(wú)菌操作把增補劑加入到備用的基礎培養基中，輕輕混合均勻(使其終濃度為60mg/L)，避免氣泡，也可按照60mg/L的比例擴大或縮小 。
6. 使用傾注程序：準備直徑為90mm的已滅菌的帶蓋培養皿，每個(gè)培養基接種1ml樣品，然后傾注混合均勻的培養基 15±1ml，混合均勻使其凝固，倒置，37℃培養16小時(shí) ,24小時(shí) 和48小時(shí)，觀(guān)察結果 。
7. 如果使用表面接種程序：將培養基傾注于已滅菌的培養皿中（用前貯存于2－8℃，避光，接種前應先恢復至室溫）。樣品劃線(xiàn)接種或者涂布接種于 培養基表面，在37℃培養18小時(shí)，24小時(shí)和48小時(shí)，觀(guān)察結果。

【貯存】

1、法國科瑪嘉VRE顯色培養基干粉需保存在15-30℃干燥環(huán)境中，增補劑保存于2－8℃環(huán)境下。

2、傾注好的培養基在室溫可保存一天，2－8℃冰箱中避光可以貯存兩星期。

【結果】

★ 極少數其他菌屬菌株如乳酸桿菌素可能呈現很小的紫色菌落。

★ 使用過(guò)的培養基需要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按照有關(guān)規定丟棄。